Séance du 31/01/18 Virginie.

Lors de cette séance, j'étais toute seule pour le projet.

J'ai cherché des protocoles pour faire un dosage des ions nitrates NO₃-  dans de l'eau de bouteille.
Pour cela, il faut réaliser une courbe d'étalonnage avec plusieurs solutions contenant du nitrate à concentration connue.
Pour tracer cette courbe d'étalonnage, nous devons passer les solutions préparées au spectrophotomètre.

Protocole de préparation de la solution mère:

Pour la préparation de la solution mère, j'ai effectué une dissolution.

- Peser la masse du solide nécessaire dans une coupelle et l'introduire dans une fiole jaugée du volume souhaité. Ici, nous avons pesé 0.202g de KNO3 qu'on a introduit dans une fiole de 100mL.
- Rincer la coupelle à l'eau distillée.
- Remplir la fiole avec de l'eau distillée aux 2/3 puis agiter.
- Remplir la fiole jusqu'au trait de jauge.
- Secouer pour homogénéiser la solution.

Voici une photo du nitrate de potassium.

Ensuite j'ai dilué la solution obtenu par 10. C'est à dire que j'ai prélevé 10mL de la solution que j'ai introduit dans une fiole de 100mL. Notre solution mère est donc de 2.10E-3.
Liste de matériels:

• Fiole jaugée de 100mL
• Spatule
• Entonnoir
• Sabot
• Balance
• Pissette d'eau distillée
• KNO3

Protocole de préparation des solutions filles:

Pour la préparation de la solution mère, j'ai effectué une dilution.

- Prélever le volume de la solution mère nécessaire à l'aide d'une pipette jaugée puis l'introduire dans une fiole jaugée du volume souhaité. Ici, nous avons prélevé plusieurs volumes de solution mère (voir tableau ci dessous) qu'on a introduit dans une fiole de 50 mL.
- Remplir la fiole avec de l'eau distillée aux 2/3 puis agiter.
- Remplir la fiole jusqu'au trait de jauge.
- Secouer pour homogénéiser la solution.

J'ai alors obtenu 6 solutions filles de valeurs comprises entre 1.00E-6 et 1.00E-5 mol/L.

 Voici les photos des deux pipettes que j'ai utilisé pour prélever les volumes mères. Ce sont des pipettes qui peuvent prélever de très petit volumes et qui sont précises.
Moi j'ai du prélever des volumes de 0.1 mL à 1 mL.

Grâce à ces solutions, maintenant je peux réaliser la courbe d'étalonnage. Pour réaliser cette courbe d'étalonnage je l'effectue grâce à un spectrophotomètre UV (voir photo ci-dessous). Car les solutions que j'ai ne ne sont pas colorées nous ne pouvons pas déterminer l'absorbance avec le spectre visible.

Voici le domaine du visible, il se situe entre 400 nm et 700 nm. 

Voici le domaine de l'ultra-violet il est divisé entre 3 partie les UV-A, UV-B, et les UV-C.

J'ai réglé le spectrophotomètre à 210 nm nous nous trouvons donc dans les UV-C. Pour la spectrophotométrie j'ai utilisé une cuve en quartz. 

Ensuite j'ai réalisé la courbe grâce aux valeurs obtenus sur regressi. Voir courbe ci-dessous.

Cette courbe est une courbe d’étalonnage, elle va nous permettre de trouvé la concentration en nitrate des eaux que l'on souhaite analyser.